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【论文一分钟】你所不知道的危险关系——“MG感染”与“精子DNA碎片率”

2019-01-08 22:01:00 分类:顶刊鉴析

生殖支原体(mycoplasma genitalium,MG) 是1981年由Tully首次从男性非淋菌性尿道炎(NGU)患者的泌尿道中分离出来的新的支原体。男性感染MG后可导致急慢性非淋球菌性尿道炎、前列腺炎、淋病后尿道炎、获得性反应性关节炎、睾丸附睾炎,甚至与HIV感染有高度相关,而女性MG感染率更高,危害更大。MG感染导致男性不育或精液质量的下降也有报道,但研究结论一直存在争议。


然而MG自发现以来,鉴于其分离培养较为困难,临床上无法使用培养来检查生殖支原体,而抗体免疫的方法存在交叉感染,准确性很低,无实际临床意义。直到2013年世界卫生组织的性传播疾病诊断指南将核酸扩增法(NAAT)列为生殖支原体唯一的诊断方法。同时,WHO强调利用16S rRNA为靶标的RNA检测技术,在灵敏度上比PCR要高,是目前一种灵敏度、特异度均非常高的MG检测技术。作为RNA技术中的一种,实时荧光核酸恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,简称 SAT)是国内独家以16S rRNA为检测靶标的分子检测技术。


为明确MG感染对男性精液质量的影响,郑州大学第一附属医院外科医学部/南方医科大学南京临床医学院/南京军区南京总医院/青岛大学基础医学院人体机能学实验室虚拟实验室/金湖县人民医院检验科对此进行了深入研究,并在《中华男科学》杂志上发表了《生殖支原体感染对男性不育患者精液质量的影响》一文:文章采用SAT技术作为MG感染的检测方法,探讨生殖支原体(MG) 在男性不育患者中的感染情况及其对精液质量的影响。



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研究方法:

       收集2015年3月-7月来南京军区南京总医院生殖医学中心门诊的352例不育患者的精液标本。MG感染采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT) 检测,精液分析根据《WHO人类精液检查与处理实验室手册》第5版进行操作,分析精液PH值、精液量、精子总数、精子浓度、精子总活力、前向运动精子百分率(PR) 、不动精子百分率(IM) 、精子DNA碎片化指数(DFI)等。探讨生殖支原体(MG)在男性不育患者中的感染情况及其对精液质量的影响。检测结果的数据统计采用t检验(t-tests)与非参数检验(Wilcoxon test)的方法。



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研究结果:

       采用SAT技术检测352例男性不育门诊患者的精液样本,分析其MG感染情况,结果检测出12例阳性,MG感染阳性率为3.4%(12/352) 。MG阴性组与MG阳性组患者的平均年龄(30.53±0.27 vs 31.83±1.83) 岁,平均不育时间(2.97±0.13 vs 2.55±0.39) 年,差异无统计学意义(表1) 。



       分析178 例患者(166例MG阴性不育患者和12例MG阳性的患者)的精液参数,比较MG阳性与MG阴性不育患者间精液质量。结果发现,MG阴性患者在精液量[(3.84±0.12)ml vs (2.85±0.14)ml,P=0.008 、PR (23.57±0.99)% vs (15.86±1.72)%,P=0.032]均要显著高于MG 阳性患者,DFI[(20.71±1.55)% vs (30.73±2.24)%,P=0.014]则显著低于MG阳性患者。两组患者的精PH值均在正常范围内,而精子浓度、精子总数、精子总活率、IM两组间无统计学差异。见表2。




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结论:

研究发现MG可以吸附在精子的头、体、尾各段,直接影响精子活力,当精子上吸附较多MG后则失去运动能力,随后大量精子粘合在一起,但是少量携带MG的精子仍然可以运动,尤其当MG吸附在精子体部和颈部的时候。研究同时发现精子膜表面大量抗精子抗体存在,这种乳胶粒是MG的8倍大,暗示MG引起精子运动能力下降不仅仅是由于直接的机械损伤,更是包含抗原抗体反应在内的更广范的生物学机制的综合作用。


本研究对比两组患者的精液参数与WHO第5版精液分析正常标准参考值,发现两组患者的精液PH值(≥7.2)、精液量(>1.5ml)、精子浓度(>15×106/ml)、精子总数(>39×106 个/1次射精) 均在正常范围内,PR 均低于WHO第5版精液分析正常标准参考值下限,而IM则偏高。精子活力是衡量精液质量和男性生育力的重要指标之一,以上数据可见本研究对象大部分为弱精子症不育患者,弱精子症在不育男性中约占19%,是男性不育的常见病因。


研究还比较了166例MG感染阴性和12例MG感染阳性不育患者间的精液参数,发现MG感染阳性患者精液量(P=0.008)、PR(P=0.032) 均比MG阴性患者要低,而DFI(P=0.014) 则显著高于阴性对照组。精子浓度、精子总数、精子总活率、IM虽然在两组间无统计学差异,但以上指标在MG阴性不育患者均要略好于MG感染阳性不育患者。说明MG感染可影响精液质量,尤其是精子活力。


除此之外,本研究还发现MG感染不育患者比无感染不育患者其DFI(P=0.014) 显著上升,该发现也是国内首次报道,这也可能是MG导致精子活力下降或者男性不育的一个原因。目前评估男性生育力主要是常规精液分析,包括精液量、PH值、精子浓度、活力、形态。但是大约15%的男性不育患者的常规精液分析结果是正常的,准确的诊断就不能简单依靠常规精液分析了,精子DNA损伤就是一个新的衡量指标。据报道成熟精子可表达不同程度的损伤凋亡相关标志。因为精子DFI对受精和妊娠结局有重要影响,所以精子DNA损伤被认为是一个新的评价精液质量和预测生育能力的指标。国外研究发现CT/MG/UU感染可导致精子DNA碎片增多。本研究与此一致。


       综上所述,本研究在不育患者中比较了MG阳性与阴性患者间精液参数的差别,发现MG阳性和阴性患者的精液量、PR和DFI存在统计学差异。同时也证实了SAT技术是一种快速、准确、有效的MG检测方法,其对泌尿生殖道等感染的病因学与流行病学检测都将有非常广泛的应用。

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