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顶刊鉴析 | HBV RNA是HCC病人远端非瘤组织癌变风险因子

2022-05-13 10:33:00 分类:顶刊鉴析

原发性肝癌是我国非常高发的一种消化系统恶性肿瘤,在早期难以发现,因此大多数肝癌患者在诊断时多为中晚期,失去了进行肝切除术的黄金时期。即使进行了肝切除术,肝癌的预后也很差,五年生存率仅为12.1%,五年复发率高达50%-70%。发现晚、手术难、术后复发率高、生存率低等特点,使得肝癌成为严重威胁我国国民生命安全的刽子手。而据研究显示,80%的原发性肝癌与HBV感染有关,慢性乙肝患者进展为肝癌的风险远高于正常人,因此监测该群体病人肝癌的发生风险、优化抗癌治疗、预测术后复发风险成为首当其中的问题。

 肿瘤干细胞理论指出,肿瘤组织是由不同等级、不同分化程度的异质细胞组成的,细胞特征包括大量的自我更新,表达多能干性基因,参与改变细胞代谢过程、细胞周期进展和强效肿瘤启动的程序。因此,已有大量证据显示肝癌干细胞(CSCs)的存在会引起化疗耐药性和治疗或手术后的癌症复发。然而cccDNA和HBV RNA存在于肝癌细胞中,证实HBV病毒的复制可以在癌细胞中展开,而且HBV会协助CSCs的形成,最终造成肝癌预后不理想的结果。但是有关HBV病毒颗粒的复制、与肝癌细胞干性之间的关系、以及肝癌复发的联系还不明朗。

来自北京大学庄辉院士及多个团队联合于2022年4月发表在Frontiers in Microbiology上的一篇研究揭示了HBV RNA作为重要的评估指标反映HBV病毒在癌组织及非癌组织中的复制水平、与肝癌干细胞的关系以及与肝癌复发的联系。该研究收集了来自55名HCC患者的肿瘤组织(T),匹配临近的非肿瘤组织(NT),和远端非肿瘤组织(FNT)进行分析。区别于传统的肝癌研究,该研究将肝癌病人非癌组织的癌变风险通过HBV RNA进行了预估

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有趣的是,HBV DNA与HBV RNA在三种不同组织中的含量并不一致(图1)。cccDNA水平在以上三种组织中无明显差别的情况下,T组织中的HBV DNA水平显著高于NT和FNT组织。文章指出,由于HBV DNA并不仅仅来源于HBV病毒的复制,也来源于其他DNA片段的整合,且癌组织中DNA整合比例高于正常组织,由此推导HBV DNA并不是一个在肿瘤组织中评估病毒复制水平的优良指标。而HBV RNA在T组织中表达较低,意味着HBV的复制过程在转录阶段受到高水平抑制,而这种HBV RNA的抑制机理与cccDNA含量无关。因此,相比于HBV DNA,HBV RNA能够在一定程度上解释三种组织中病毒复制的差异性,是评估HBV病毒在肿瘤组织中复制水平的关键指标。


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图1:HBV DNA、cccDNA和HBV RNA在三种组织中的水平

进一步对来自三种组织中的HBV S、逆转录酶和 X基因进行基因测序发现,即使是来自于同一个HCC患者,HBV病毒的基因序列以及基因型在T、NT、以及FNT组织中均存在差异性(图2)。而且HBV RNA在HBsAg阴性患者的NT组织中与CSCs的关系更紧密,证实HBV RNA可能在CSCs的形成及致癌过程中发挥作用。

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图2:HBV S、逆转录酶和X基因系谱树

值得一提的是,HBV RNA被发现与肝癌术后的复发风险呈正相关。远端非癌组织中HBV RNA含量越高,肝癌复发率越高,生存率越低。因此,在肝癌病人FNT组织中HBV RNA的表达能够预测肝癌术后的复发风险,是重要的肝癌复发风险因子。这对于HCC-HBV病人肝切除术预后是突破性的进展,显然,研究非癌组织比研究癌组织更加有价值,因为已经切除的癌变组织不能够对病人再造成威胁,而该发现提供了绝佳的监测目前非癌组织的远期癌变风险。

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图3:HBV RNA评估FNT组织远期癌变风险

HBV病毒的复制不仅与肝癌干细胞的形成及致癌机理相关,更与肝癌术后复发相关。HBV RNA是评估肿瘤组织中HBV病毒复制水平的关键指标,且能够监测目前非癌组织的远期癌变风险,在此过程中,HBV RNA检测试剂的灵敏度至关重要,灵敏度低的检测试剂漏检风险较大,很有可能延误治疗时机。

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除了检测下限,检测方法同样重要。HBV RNA检测常用技术有SAT技术(直接定量法)及RT-PCR(间接定量法),RT-PCR方法需使用DNA酶处理样本,易造成RNA损耗影响检测结果,仁度生物的HBV RNA检测试剂采用直接定量技术,无需DNA酶处理,检测结果更精准。相关研究显示,HBV RNA直接定量法(SAT)比间接定量法(RT-PCR)检出率高出10%以上。

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