肺炎支原体诊断的检测方法包括培养法、免疫法和分子生物学检测法。

MP-Ab 检测是目前临床常用的诊断MP 感染的方法，单份血清MP-Ab 滴度≥ 1 : 160 对近期MP 感染有诊断意义；恢复期和急性期MP 抗体滴度呈4 倍或4 倍以上增高时可以确诊。但是由于MP 感染后诱导体液免疫反应约1 周后才产生抗体，3~6 周可达高峰，2~3 个月后逐渐下降，故难以达到早期诊断的目的。

实时荧光核酸恒温扩增检测技术（后简称SAT）是一种新型的分子生物学检测方法，以病原体特异的RNA 为靶标，采用恒温扩增的方法，15~30 min即可将模板扩增10⁹ 倍，MP-SAT 检测最低可以准确地识别出10 CFU/mL 的病原菌，具有较高的灵敏度。

为了探究SAT能否弥补血清学检测难以用于早期诊断的问题，郑州大学附属儿童医院/ 河南省儿童医院/ 郑州儿童医院在《中国当代儿科杂志》发表了实时荧光核酸恒温扩增检测技术在肺炎支原体肺炎早期诊断中的价值及影响因素分析一文。

文章对比了血清MP-Ab和MP-SAT的检测结果以及两种方法在短病程组和长病程组检测的敏感度，分析了SAT在儿童肺炎支原体肺炎（MPP）早期诊断中的应用价值。

选取2016 年12 月至2017 年12 月住院治疗的社区获得性肺炎患儿526例，采用颗粒凝集法检测MP 血清学抗体（MP-Ab），并以此结果为参照，评价SAT 用于诊断MPP 的价值。

以MP-Ab 结果为参照，MP-SAT 检测结果阳性共158 例，其中MPP 150 例，非MPP 8 例。MPSAT诊断MPP 的敏感度为90.9%（150/165）、特异度为97.9％（368/376）、阳性预测值为94.9%（150/158）、阴性预测值为98.1%（361/368）、阳性似然比为43.3、阴性似然比为0.09。诊断的准确性分析显示，YI 为0.89，准确性高；一致性分析显示，Kappa 值为0.90（P<0.001），两者的一致性好。

根据入院时病程，将患儿分为短病程组（<7 d）和长病程组（≥ 7 d），在短病程组中，MP-SAT阳性率为95%（93/98）；长病程组中MP-SAT 阳性率为85%（57/67），MP-SAT 在短病程组的诊断敏感度明显高于长病程组（χ2=4.646，P=0.031）。

在165 例MPP 患儿中，单份血清MP-Ab 阳性112 例，阳性率为67.9%（112/165），MP-SAT 检测阳性150 例，阳性率为79.4%（150/165），MP-SAT的诊断敏感度明显高于单份血清MP-Ab 检测（χ2=5.635，P=0.018）。一致性分析显示，Kappa值为0.039（P<0.001），两者的一致性差。

单份血清MP-Ab 阴性的414 例患儿于入院10 d 后再次行血清MP-Ab 检测，结果有53例患儿血清P-Ab 较入院时呈4 倍及以上增高。414 例患儿中，51 例入院时 MP-SAT 检测结果阳性，其中MPP 48 例；非MPP 3 例。一致性分析显示，Kappa 值为0.91（P<0.001），两者的一致性好。

将可能影响MP-SAT 诊断MPP 的7 个因素进行单因素分析。结果显示：性别（女）、年龄（≤ 3 岁）、病程（≥ 7 d）、院外应用大环内酯类药物治疗、难治性MPP 对MP-SAT 诊断MPP 的准确性产生影响（P<0.05），而季节和是否为重症MPP 对MPSAT诊断MPP 的准确性无影响（P>0.05）。见表1。

为了消除混杂因素的干扰，将单因素分析有意义的因素，进一步采用多因素logistic 回归模型进行分析，结果显示病程（≥ 7 d）、应用大环内酯类药物治疗是影响MP-SAT 检出结果的主要因素（P<0.05）。

MP-SAT 在MPP 的早期诊断中应用价值高，可以有效弥补急性期单份血清MP-Ab 检测的不足，辅助临床进行早期诊断；尽可能在病程早期（<7 d）和大环内酯类药物应用前进行MP-SAT 检测。

本研究中MP-SAT 在MPP 的诊断中敏感度高达90.9%（150/165），且诊断的准确性高（YI=0.89）， 与血清MP-Ab 抗体总体检测的一致性好（Kappa=0.90）， 提示MP-SAT 在MPP 的诊断中应用价值高。

在本组资料中，入院时单份血清MP-Ab 敏感度仅为67.9%， 明显低于MP-SAT 的敏感度（79.4%）， 两者的一致性差（Kappa=0.039）， 但是MP-SAT 与双份血清MP-Ab 的一致性好（Kappa=0.91）。这可能与部分患儿抗体产生较晚，或免疫功能发育不完善产生抗体能力较弱，从而导致单次MP-Ab 检测不出有关。而MP-SAT 检测的是病原体本身，不受自身免疫等相关因素的影响，可以有效弥补MP 感染后因抗体产生延迟而导致的单份血清抗体检测假阴性的不足。

本研究还发现MP-SAT 在短病程组的诊断敏感度明显高于长病程组，进一步提示MP-SAT在MPP 的早期诊断中具有较高应用价值。