乙型肝炎病毒(HBV)感染是全球性公共卫生问题，全球约有2.57亿慢性HBV感染者，每年约有88.7万人死于HBV感染相关肝病，肝硬化和原发性肝细胞癌。HBV病毒感染人体后，病毒共价闭合环状DNA(cccDNA)池在肝脏细胞内形成，通过子代病毒rcDNA不断回补与修复，使得病毒cccDNA池长期稳定存在于肝细胞核内而无法完全清除，造成大多数慢乙肝患者的停药后复发。

在目前获批的核苷(酸)类和干扰素药物抗病毒治疗下，HBV DNA复制活动由于长期受到抑制，其含量很容易低于检测下限而检测不到，但这并不能反映肝内cccDNA的转录活性；并且在临床实践中，肝内cccDNA水平的直接评估需要进行有创的肝穿刺活检，患者接受度较低，因此亟需能够准确反映cccDNA转录活性的无创指标来监测患者体内HBV的活动情况。

HBV RNA是目前临床尚未大量推广的HBV新型生物标志物,且为肝内cccDNA的直接转录物，下游逆转录成子代病毒基因组的rcDNA，上承cccDNA，下接rcDNA，其关键的桥梁位置奠定了HBV RNA作为新型乙肝生物学标志物在监测抗病毒疗效、预测应答和HBV感染相关疾病方面具有重要的临床意义。

HBV属嗜肝DNA病毒科，是基因组为3.2kb的部分双链松弛环状DNA(rcDNA)。HBV病毒颗粒由NTCP受体介导进入肝细胞内，rcDNA会被运送进肝细胞核内，经过DNA连接酶等的修补形成cccDNA。而cccDNA作为转录模板，可以下游产生5种具有相同3’末端的mRNA，其中3.5kb长的pgRNA是血清中HBVRNA最主要的种类，但是长度不一，既存在全长pgRNA、也存在3’端截断型pgRNA和剪接型pgRNA。

血清中HBV RNA的存在形式也较为复杂。研究发现，HBV RNA被包被在核衣壳中，其外可覆盖或不覆盖病毒的外包膜。该研究证实，HBV RNA类病毒颗粒能够同时在慢乙肝病人的血清和细胞培养液中检测到，且大部分的HBV RNA以“裸露”的核衣壳无病毒外包膜包被的形式存在(图1)。该研究指出，若封锁多泡小体分泌途径(MVB)，有病毒外包膜包被的HBV RNA颗粒和HBV DNA病毒颗粒含量大幅下降至检测不到，而无病毒外包膜包被的HBV RNA颗粒含量维持不变，证实有病毒外包膜的HBV RNA颗粒和HBV DNA病毒颗粒分泌途径相同，通过多泡小体（MVB）途径分泌至胞外(图1)，而无病毒外包膜包被的HBV RNA颗粒的分泌则可能采取了其他途径。

图1：HBV RNA的种类、产生途径及释放方式

由于HBV RNA是cccDNA的直接转录物，与其他血清标志物相比，无论有无核苷类药物干预，与cccDNA的相关性都更好，因此HBV RNA可以作为能够更加准确反映肝内cccDNA水平和转录活性的血清标志物。目前，有关HBV RNA的临床应用场景主要囊括以下4个方面：①区分HBV感染自然病程中的4个不同阶段；②评估抗病毒治疗疗效；③预测停药后的复发风险；④预测肝癌的发生风险 (图2)。目前已有多篇高影响因子文章，包括上海东方肝胆医院、南方医院和香港玛丽医院等揭示了HBV RNA用于原发性肝癌的预测价值和肝癌术后复发的监测价值，并得到国际相关指南和共识的推荐。

图2：血清HBV RNA的分子特征和潜在应用场景

由于HBV RNA在未来还有一些待探索的领域，例如HBV RNA颗粒是否具有感染性？裸衣壳HBV RNA颗粒是以什么途径分泌到胞外的？HBV RNA上不同的转录后修饰类型对结构和功能有什么样的影响？因此，HBV RNA的精准定量就显得尤为重要。文章指出，目前多样化的PCR技术是HBV RNA定量的不错选择，包括RACE-PCR，液滴PCR，和传统的qRT-PCR技术等。

但是，由于PCR技术是对HBV RNA进行间接定量，DNA酶的使用会降解掉部分HBV RNA，造成定量结果的不准确性。而仁度生物乙型肝炎病毒核酸测定试剂盒，以其独特的检测技术率先获准上市。

区别于传统的PCR技术，本试剂盒采用独特的SAT技术，即RNA实时荧光扩增技术，其能对RNA分子进行直接扩增和定量，不受样本中的HBV DNA干扰，无需DNA酶处理，提升了检测灵敏度和特异性，并搭配全自动检测平台使用，可减少操作误差，节约人力，取得良好的社会效益。

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